Ви благодариме што ја посетивте Nature.com.Верзијата на прелистувачот што ја користите има ограничена поддршка за CSS.За најдобри резултати, препорачуваме да користите понова верзија на вашиот прелистувач (или да го оневозможите режимот на компатибилност во Internet Explorer).Во меѓувреме, за да обезбедиме постојана поддршка, ја прикажуваме страницата без стајлинг или JavaScript.
Комбинациите на инсектицидни соединенија од растително потекло може да покажат синергистички или антагонистички интеракции против штетниците.Со оглед на брзото ширење на болестите што ги носат комарците Aedes и зголемената отпорност на популациите на комарците Aedes на традиционалните инсектициди, дваесет и осум комбинации на терпенски соединенија базирани на растителни есенцијални масла беа формулирани и тестирани против фазите на ларви и возрасни на Aedes aegypti.Пет растителни есенцијални масла (ЕО) првично беа евалуирани за нивната ларвицидна и ефикасност за употреба кај возрасни, и две главни соединенија беа идентификувани во секој ЕО врз основа на резултатите од GC-MS.Главните идентификувани соединенија беа купени, а тоа се диалил дисулфид, диалил трисулфид, карвон, лимонен, еугенол, метил еугенол, еукалиптол, еудесмол и алфа-пинен од комарци.Бинарни комбинации на овие соединенија потоа беа подготвени со користење на сублетални дози и нивните синергистички и антагонистички ефекти беа тестирани и утврдени.Најдобрите ларвицидни состави се добиваат со мешање на лимонен со диалил дисулфид, а најдобри адултицидни состави се добиваат со мешање на карвон со лимонен.Комерцијално користениот синтетички ларвицид Темфос и лекот за возрасни Малатион беа тестирани одделно и во бинарни комбинации со терпеноиди.Резултатите покажаа дека комбинацијата на темефос и диалил дисулфид и малатион и еудесмол е најефективната комбинација.Овие моќни комбинации имаат потенцијал за употреба против Aedes aegypti.
Растителните есенцијални масла (ЕО) се секундарни метаболити кои содржат различни биоактивни соединенија и стануваат сè поважни како алтернатива на синтетичките пестициди.Не само што се еколошки и прифатливи за корисниците, туку се и мешавина од различни биоактивни соединенија, што исто така ја намалува веројатноста за развој на отпорност на лекови1.Со помош на технологијата GC-MS, истражувачите ги испитуваа состојките на различните растителни есенцијални масла и идентификуваа повеќе од 3.000 соединенија од 17.500 ароматични растенија2, од кои повеќето беа тестирани за инсектицидни својства и се пријавени дека имаат инсектицидни ефекти3,4.Некои студии нагласуваат дека токсичноста на главната компонента на соединението е иста или поголема од онаа на неговиот суров етилен оксид.Но, употребата на поединечни соединенија може повторно да остави простор за развој на отпорност, како што е случајот со хемиските инсектициди5,6.Затоа, сегашниот фокус е на подготовка на мешавини на соединенија базирани на етилен оксид за да се подобри инсектицидната ефикасност и да се намали веројатноста за отпор кај целните популации на штетници.Индивидуалните активни соединенија присутни во ЕО може да покажат синергистички или антагонистички ефекти во комбинации што ја одразуваат целокупната активност на ЕО, факт што е добро нагласен во студиите спроведени од претходните истражувачи7,8.Програмата за векторска контрола исто така вклучува EO и неговите компоненти.Комарцицидната активност на есенцијалните масла е опширно проучувана на комарците Culex и Anopheles.Неколку студии се обидоа да развијат ефективни пестициди со комбинирање на различни растенија со комерцијално користени синтетички пестициди за да се зголеми вкупната токсичност и да се минимизираат несаканите ефекти9.Но, студиите за такви соединенија против Aedes aegypti остануваат ретки.Напредокот во медицинската наука и развојот на лекови и вакцини помогнаа во борбата против некои болести кои се пренесуваат преку вектор.Но, присуството на различни серотипови на вирусот, пренесени од комарецот Aedes aegypti, доведе до неуспех на програмите за вакцинација.Затоа, кога се појавуваат такви болести, програмите за контрола на векторите се единствената опција за спречување на ширењето на болеста.Во сегашното сценарио, контролата на Aedes aegypti е многу важна бидејќи е клучен вектор на различни вируси и нивните серотипови кои предизвикуваат денга треска, зика, денга хеморагична треска, жолта треска итн. Најзначајно е фактот дека бројот на случаите на скоро сите векторски преносливи болести Аедес се зголемуваат секоја година во Египет и се зголемуваат во светот.Затоа, во овој контекст, постои итна потреба да се развијат еколошки и ефективни мерки за контрола на популациите на Aedes aegypti.Потенцијални кандидати во овој поглед се ЕО, нивните составни соединенија и нивните комбинации.Затоа, оваа студија се обиде да идентификува ефективни синергистички комбинации на клучни растителни ЕО соединенија од пет растенија со инсектицидни својства (т.е. нане, свети босилек, дамка од еукалиптус, сулфур Allium и melaleuca) против Aedes aegypti.
Сите избрани ЕО покажаа потенцијална ларвицидна активност против Aedes aegypti со 24-часовен LC50 кој се движи од 0,42 до 163,65 ppm.Највисока ларвицидна активност е забележана за пеперминт (Mp) EO со вредност LC50 од 0,42 ppm на 24 часа, проследено со лук (As) со вредност LC50 од 16,19 ppm на 24 часа (Табела 1).
Со исклучок на Ocimum Sainttum, Os EO, сите други четири прегледани EO покажаа очигледни алерцидни ефекти, со вредности на LC50 кои се движат од 23,37 до 120,16 ppm во текот на 24-часовниот период на изложеност.Thymophilus striata (Cl) EO беше најефикасен во убивањето на возрасните со LC50 вредност од 23,37 ppm во рок од 24 часа од изложувањето, проследено со Eucalyptus maculata (Em) кој имаше вредност LC50 од 101,91 ppm (Табела 1).Од друга страна, вредноста на LC50 за Os сè уште не е одредена бидејќи највисоката стапка на смртност од 53% е забележана во највисоката доза (Дополнителна слика 3).
Двете главни составни соединенија во секој EO беа идентификувани и избрани врз основа на резултатите од базата на податоци од библиотеката NIST, процентот на површината на GC хроматограмот и резултатите од MS спектрите (Табела 2).За EO As, главните соединенија идентификувани беа диалил дисулфид и диалил трисулфид;за EO Mp главните идентификувани соединенија беа карвон и лимонен, за EO Em главните соединенија идентификувани беа еудесмол и еукалиптол;За EO Os, главните идентификувани соединенија беа еугенол и метил еугенол, а за EO Cl, главните соединенија идентификувани беа еугенол и α-пинен (Слика 1, Дополнителни слики 5-8, Дополнителна табела 1-5).
Резултати од масената спектрометрија на главните терпеноиди на избраните есенцијални масла (А-диалил дисулфид; Б-диалил трисулфид; С-еугенол; Д-метил еугенол; Е-лимонен; F-ароматичен цеперон; Г-а-пинен; H-цинеол Р-еудамол).
Вкупно девет соединенија (дијалил дисулфид, диалил трисулфид, еугенол, метил еугенол, карвон, лимонен, еукалиптол, еудесмол, α-пинен) беа идентификувани како ефективни соединенија кои се главни компоненти на EO и беа индивидуално биоиспитани против Aedes atlarvalgy фази..Соединението еудесмол имаше највисока ларвицидна активност со вредност LC50 од 2,25 ppm по 24 часа изложеност.Утврдено е дека соединенијата диалил дисулфид и диалил трисулфид имаат потенцијални ларвицидни ефекти, со просечни сублетални дози во опсег од 10-20 ppm.Повторно е забележана умерена ларвицидна активност за соединенијата еугенол, лимонен и еукалиптол со вредности на LC50 од 63,35 ppm, 139,29 ppm.и 181,33 ppm по 24 часа, соодветно (Табела 3).Сепак, не беше пронајден значителен ларвициден потенцијал на метил еугенол и карвон дури и во највисоките дози, така што вредностите на LC50 не беа пресметани (Табела 3).Синтетичкиот ларвицид Temephos имаше средна смртоносна концентрација од 0,43 ppm против Aedes aegypti во текот на 24 часа изложеност (Табела 3, Дополнителна табела 6).
Седум соединенија (дијалил дисулфид, диалил трисулфид, еукалиптол, α-пинен, еудесмол, лимонен и карвон) беа идентификувани како главни соединенија на ефективни ЕО и беа тестирани поединечно против возрасни египетски комарци Aedes.Според Пробит регресионата анализа, беше откриено дека Eudesmol има највисок потенцијал со вредност LC50 од 1,82 ppm, следен од еукалиптол со вредност LC50 од 17,60 ppm при 24-часовно време на експозиција.Останатите пет тестирани соединенија беа умерено штетни за возрасните со LC50s кои се движат од 140,79 до 737,01 ppm (Табела 3).Синтетичкиот органофосфорен малатион беше помалку моќен од еудесмол и повисок од другите шест соединенија, со вредност LC50 од 5,44 ppm во текот на 24-часовниот период на изложеност (Табела 3, Дополнителна табела 6).
Седум моќни соединенија на олово и органофосфорниот тамефосат беа избрани за да се формулираат бинарни комбинации на нивните LC50 дози во сооднос 1:1.Вкупно 28 бинарни комбинации беа подготвени и тестирани за нивната ларвицидна ефикасност против Aedes aegypti.Утврдено е дека девет комбинации се синергистички, 14 комбинации биле антагонистички, а пет комбинации не биле ларвицидни.Меѓу синергетските комбинации, комбинацијата на диалил дисулфид и темофол беше најефикасна, со 100% смртност забележана по 24 часа (Табела 4).Слично на тоа, мешавините на лимонен со диалил дисулфид и еугенол со тиметфос покажаа добар потенцијал со забележана смртност од ларви од 98,3% (Табела 5).Останатите 4 комбинации, имено еудесмол плус еукалиптол, еудесмол плус лимонен, еукалиптол плус алфа-пинен, алфа-пинен плус темефос, исто така покажаа значителна ларвицидна ефикасност, со забележана стапка на смртност која надминува 90%.Очекуваната стапка на смртност е близу 60-75%.(Табела 4).Сепак, комбинацијата на лимонен со α-пинен или еукалиптус покажа антагонистички реакции.Слично, беше откриено дека мешавините на Темефос со еугенол или еукалиптус или еудесмол или диалил трисулфид имаат антагонистички ефекти.Исто така, комбинацијата на диалил дисулфид и диалил трисулфид и комбинацијата на кое било од овие соединенија со еудесмол или еугенол се антагонистички во нивното ларвицидно дејство.Антагонизам е забележан и при комбинација на еудесмол со еугенол или α-пинен.
Од сите 28 бинарни мешавини тестирани за кисела активност кај возрасни, 7 комбинации беа синергистички, 6 немаа ефект, а 15 беа антагонистички.Беше откриено дека мешавините на еудесмол со еукалиптус и лимонен со карвон се поефикасни од другите синергистички комбинации, со стапка на смртност на 24 часа од 76% и 100%, соодветно (Табела 5).Забележано е дека малатион покажува синергетски ефект со сите комбинации на соединенија освен лимонен и диалил трисулфид.Од друга страна, пронајден е антагонизам помеѓу диалил дисулфид и диалил трисулфид и комбинацијата на кој било од нив со еукалиптус, или еукалиптол, или карвон или лимонен.Слично на тоа, комбинациите на α-пинен со еудесмол или лимонен, еукалиптол со карвон или лимонен и лимонен со еудесмол или малатион покажале антагонистички ларвицидни ефекти.За преостанатите шест комбинации, немаше значајна разлика помеѓу очекуваната и набљудуваната смртност (Табела 5).
Врз основа на синергистичките ефекти и сублеталните дози, нивната ларвицидна токсичност против голем број комарци Aedes aegypti на крајот беше избрана и дополнително тестирана.Резултатите покажаа дека набљудуваната смртност на ларвите со користење на бинарните комбинации еугенол-лимонен, диалил дисулфид-лимонен и диалил дисулфид-тимефос беше 100%, додека очекуваната смртност на ларвите беше 76,48%, 72,16% и 63,4%, соодветно (Табела 6)..Комбинацијата на лимонен и еудесмол беше релативно помалку ефикасна, со 88% смртност од ларви забележана во текот на 24-часовниот период на изложеност (Табела 6).Накратко, четирите избрани бинарни комбинации, исто така, покажаа синергистички ларвицидни ефекти против Aedes aegypti кога се применуваат во голем обем (Табела 6).
Беа избрани три синергистички комбинации за адулоцидната биоесеј за контрола на големи популации на возрасни Aedes aegypti.За да избереме комбинации за тестирање на големи колонии на инсекти, прво се фокусиравме на двете најдобри синергистички комбинации на терпен, имено карвон плус лимонен и еукалиптол плус еудесмол.Второ, најдобрата синергетска комбинација беше избрана од комбинацијата на синтетички органофосфат малатион и терпеноиди.Сметаме дека комбинацијата на малатион и еудесмол е најдобрата комбинација за тестирање на големи колонии на инсекти поради највисоката забележана смртност и многу ниските вредности на LC50 на кандидатите состојки.Малатион покажува синергизам во комбинација со α-пинен, диалил дисулфид, еукалиптус, карвон и еудесмол.Но, ако ги погледнеме вредностите LC50, Eudesmol има најниска вредност (2,25 ppm).Пресметаните LC50 вредности на малатион, α-пинен, диалил дисулфид, еукалиптол и карвон беа 5,4, 716,55, 166,02, 17,6 и 140,79 ppm.соодветно.Овие вредности укажуваат дека комбинацијата на малатион и еудесмол е оптимална комбинација во однос на дозата.Резултатите покажаа дека комбинациите на карвон плус лимонен и еудесмол плус малатион имале 100% забележана смртност во споредба со очекуваната смртност од 61% до 65%.Друга комбинација, еудесмол плус еукалиптол, покажа стапка на смртност од 78,66% по 24 часа изложеност, во споредба со очекуваната стапка на смртност од 60%.Сите три избрани комбинации покажаа синергистички ефекти дури и кога се применуваат во голем обем против возрасни Aedes aegypti (Табела 6).
Во оваа студија, избрани растителни EOs како што се Mp, As, Os, Em и Cl покажаа ветувачки смртоносни ефекти врз ларвите и возрасните фази на Aedes aegypti.Mp EO имаше највисока ларвицидна активност со вредност LC50 од 0,42 ppm, проследено со As, Os и Em EOs со вредност LC50 помала од 50 ppm по 24 часа.Овие резултати се во согласност со претходните студии за комарци и други диптерични муви10,11,12,13,14.Иако ларвицидната моќ на Cl е помала од другите есенцијални масла, со вредност на LC50 од 163,65 ppm по 24 часа, нејзиниот возрасен потенцијал е највисок со вредност LC50 од 23,37 ppm по 24 часа.Mp, As и Em EOs исто така покажаа добар алерциден потенцијал со вредности на LC50 во опсег од 100-120 ppm на 24 часа изложеност, но беа релативно пониски од нивната ларвицидна ефикасност.Од друга страна, EO Os покажа занемарлив алерциден ефект дури и при највисока терапевтска доза.Така, резултатите покажуваат дека токсичноста на етилен оксидот за растенијата може да варира во зависност од фазата на развој на комарците15.Тоа зависи и од стапката на пенетрација на ЕО во телото на инсектот, нивната интеракција со специфични целни ензими и капацитетот за детоксикација на комарецот во секоја развојна фаза16.Голем број на студии покажаа дека соединението на главната компонента е важен фактор во биолошката активност на етилен оксидот, бидејќи тој претставува најголем дел од вкупните соединенија3,12,17,18.Затоа, разгледавме две главни соединенија во секој ЕО.Врз основа на резултатите од GC-MS, диалил дисулфид и диалил трисулфид беа идентификувани како главни соединенија на EO As, што е во согласност со претходните извештаи19,20,21.Иако претходните извештаи укажуваа дека ментолот е едно од неговите главни соединенија, карвонот и лимоненот повторно беа идентификувани како главни соединенија на Mp EO22,23.Профилот на составот на Os EO покажа дека еугенолот и метил еугенолот се главните соединенија, што е слично на наодите на претходните истражувачи16,24.Еукалиптол и еукалиптол се пријавени како главни соединенија присутни во маслото од Ем лист, што е во согласност со наодите на некои истражувачи25,26, но спротивно на наодите на Olalade et al.27.Доминацијата на цинеол и α-пинен е забележана во етеричното масло од мелалеука, што е слично на претходните студии28,29.Интраспецифични разлики во составот и концентрацијата на етерични масла извлечени од ист растителен вид на различни локации се пријавени и исто така беа забележани во оваа студија, кои се под влијание на географските услови за раст на растенијата, времето на берба, фазата на развој или возраста на растението.појава на хемотипови и сл.22,30,31,32.Клучните идентификувани соединенија потоа беа купени и тестирани за нивните ларвицидни ефекти и ефекти врз возрасните комарци Aedes aegypti.Резултатите покажаа дека ларвицидната активност на диалил дисулфид е споредлива со онаа на суровиот EO As.Но, активноста на диалил трисулфид е повисока од EO As.Овие резултати се слични на оние добиени од Кимбарис и сор.33 на Culex Филипини.Сепак, овие две соединенија не покажаа добра автоцидна активност против целните комарци, што е во согласност со резултатите од Plata-Rueda et al 34 на Tenebrio molitor.Os EO е ефикасен против фазата на ларви на Aedes aegypti, но не и против стадиумот на возрасни.Утврдено е дека ларвицидната активност на главните поединечни соединенија е помала од онаа на суровиот Os EO.Ова имплицира улога на другите соединенија и нивните интеракции во суровиот етилен оксид.Самиот метил еугенол има занемарлива активност, додека само еугенолот има умерена ларвицидна активност.Овој заклучок, од една страна, потврдува 35,36, а од друга страна, е во спротивност со заклучоците на претходните истражувачи37,38.Разликите во функционалните групи на еугенол и метилеугенол може да резултираат со различни токсичности за истиот целен инсект39.Утврдено е дека лимоненот има умерена ларвицидна активност, додека ефектот на карвонот бил незначителен.Слично на тоа, релативно ниската токсичност на лимоненот за возрасни инсекти и високата токсичност на карвонот ги поддржуваат резултатите од некои претходни студии40, но се контрадикторни со другите41.Присуството на двојни врски и на интрациклични и на егзоциклични позиции може да ги зголеми придобивките од овие соединенија како ларвициди3,41, додека карвонот, кој е кетон со незаситени алфа и бета јаглероди, може да покаже поголем потенцијал за токсичност кај возрасните42.Сепак, индивидуалните карактеристики на лимонен и карвон се многу пониски од вкупниот EO Mp (Табела 1, Табела 3).Помеѓу тестираните терпеноиди, беше откриено дека еудесмол има најголема ларвицидна активност и активност за возрасни со вредност LC50 под 2,5 ppm, што го прави ветувачко соединение за контрола на комарците Aedes.Нејзините перформанси се подобри од оние на целиот EO Em, иако тоа не е во согласност со наодите на Cheng et al.40.Еудесмол е сесквитерпен со две изопренови единици кој е помалку испарлив од оксигенираните монотерпени како што е еукалиптусот и затоа има поголем потенцијал како пестицид.Самиот еукалиптол има поголема активност на возрасни отколку ларвицидна активност, а резултатите од претходните студии го поддржуваат и побиваат ова37,43,44.Самата активност е речиси споредлива со онаа на целиот ЕО Cl.Друг бицикличен монотерпен, α-пинен, има помал ефект врз возрасните на Aedes aegypti отколку ларвициден ефект, што е спротивно од ефектот на целосниот EO Cl.Вкупната инсектицидна активност на терпеноидите е под влијание на нивната липофилност, испарливост, разгранување на јаглеродот, проекционата површина, површината, функционалните групи и нивните позиции45,46.Овие соединенија може да дејствуваат со уништување на клеточните акумулации, блокирање на респираторната активност, прекинување на преносот на нервните импулси итн. Утала48.Возрасната активност на синтетички органофосфорен малатион беше пријавена на 5,44 ppm.Иако овие два органофосфати покажаа поволни реакции против лабораториските соеви на Aedes aegypti, отпорноста на комарците на овие соединенија е пријавена во различни делови на светот49.Сепак, не се пронајдени слични извештаи за развој на отпорност на хербални лекови50.Така, ботаниката се смета како потенцијална алтернатива на хемиските пестициди во програмите за контрола на векторите.
Ларвицидниот ефект беше тестиран на 28 бинарни комбинации (1:1) подготвени од моќни терпеноиди и терпеноиди со тиметфос, и беше откриено дека 9 комбинации се синергистички, 14 антагонистички и 5 антагонистички.Нема ефект.Од друга страна, во биоанализата за потенција кај возрасните, беше откриено дека 7 комбинации се синергистички, 15 комбинации биле антагонистички и 6 комбинации немаат ефект.Причината зошто одредени комбинации произведуваат синергетски ефект може да се должи на соединенијата кандидати кои истовремено комуницираат на различни важни патишта, или на секвенцијалната инхибиција на различни клучни ензими на одреден биолошки пат51.Утврдено е дека комбинацијата на лимонен со диалил дисулфид, еукалиптус или еугенол е синергетска и во мали и во големи апликации (Табела 6), додека неговата комбинација со еукалиптус или α-пинен е откриено дека има антагонистички ефекти врз ларвите.Во просек, лимоненот се чини дека е добар синергист, веројатно поради присуството на метил групи, добрата пенетрација во роговиден слој и различен механизам на дејство52,53.Претходно беше пријавено дека лимоненот може да предизвика токсични ефекти со навлегување во кутикулите на инсектите (токсичност од контакт), влијаејќи на дигестивниот систем (антифеедант) или влијаејќи на респираторниот систем (активност на дезинсекција), 54 додека фенилпропаноидите како еугенолот може да влијаат на метаболичките ензими 55. Затоа, комбинациите на соединенија со различни механизми на дејство може да го зголемат целокупниот смртоносен ефект на смесата.Утврдено е дека еукалиптолот е синергичен со диалил дисулфид, еукалиптус или α-пинен, но другите комбинации со други соединенија биле или неларвицидни или антагонистички.Раните студии покажаа дека еукалиптол има инхибиторна активност на ацетилхолинестеразата (AChE), како и на октааминските и ГАБА рецепторите56.Бидејќи цикличните монотерпени, еукалиптол, еугенол итн. може да го имаат истиот механизам на дејство како и нивната невротоксична активност, 57 со што се минимизираат нивните комбинирани ефекти преку меѓусебна инхибиција.Исто така, беше откриено дека комбинацијата на Темефос со диалил дисулфид, α-пинен и лимонен е синергетска, поддржувајќи ги претходните извештаи за синергистички ефект помеѓу хербалните производи и синтетичките органофосфати58.
Утврдено е дека комбинацијата на еудесмол и еукалиптол има синергетски ефект врз ларвите и возрасните фази на Aedes aegypti, веројатно поради нивните различни начини на дејствување поради нивните различни хемиски структури.Еудесмол (сесквитерпен) може да влијае на респираторниот систем 59 и еукалиптол (монотерпен) може да влијае на ацетилхолинестеразата 60 .Заедничката изложеност на состојките на две или повеќе целни места може да го подобри целокупниот смртоносен ефект на комбинацијата.Во биоанализите за супстанција за возрасни, беше откриено дека малатион е синергетски со карвон или еукалиптол или еукалиптол или диалил дисулфид или α-пинен, што покажува дека е синергичен со додавање на лимонен и ди.Добри кандидати за синергистички алерциди за целото портфолио на терпенски соединенија, со исклучок на алил трисулфид.Thangam и Kathiresan61 исто така објавија слични резултати за синергетскиот ефект на малатион со билни екстракти.Овој синергетски одговор може да се должи на комбинираните токсични ефекти на малатион и фитохемикалии врз ензимите за детоксикација на инсектите.Органофосфатите како што е малатионот генерално делуваат со инхибирање на цитохром P450 естеразите и монооксигеназите62,63,64.Затоа, комбинирањето на малатион со овие механизми на дејство и терпени со различни механизми на дејство може да го подобри целокупниот смртоносен ефект врз комарците.
Од друга страна, антагонизмот покажува дека избраните соединенија се помалку активни во комбинација од секое соединение самостојно.Причината за антагонизам во некои комбинации може да биде тоа што едно соединение го модифицира однесувањето на другото соединение со менување на стапката на апсорпција, дистрибуција, метаболизам или екскреција.Раните истражувачи сметаа дека ова е причина за антагонизам во комбинациите на лекови.Молекули Можен механизам 65. Слично, можните причини за антагонизам може да бидат поврзани со слични механизми на дејство, конкуренција на составните соединенија за истиот рецептор или целна локација.Во некои случаи, може да се појави и неконкурентна инхибиција на целниот протеин.Во оваа студија, две органосулфурни соединенија, диалил дисулфид и диалил трисулфид, покажаа антагонистички ефекти, веројатно поради конкуренцијата за истото целно место.Исто така, овие две сулфурни соединенија покажаа антагонистички ефекти и немаа ефект кога се комбинираа со еудесмол и α-пинен.Еудесмол и алфа-пинен се со циклична природа, додека диалил дисулфид и диалил трисулфид се алифатични по природа.Врз основа на хемиската структура, комбинацијата на овие соединенија треба да ја зголеми вкупната смртоносна активност бидејќи нивните целни места обично се различни34,47, но експериментално откривме антагонизам, што може да се должи на улогата на овие соединенија во некои непознати организми in vivo.системи како резултат на интеракцијата.Слично на тоа, комбинацијата на цинеол и α-пинен произведе антагонистички одговори, иако истражувачите претходно објавија дека двете соединенија имаат различни цели на дејство47,60.Бидејќи и двете соединенија се циклични монотерпени, може да има некои заеднички целни места кои може да се натпреваруваат за врзување и да влијаат на севкупната токсичност на проучуваните комбинаторни парови.
Врз основа на вредностите на LC50 и набљудуваната смртност, беа избрани двете најдобри синергистички терпенски комбинации, имено паровите карвон + лимонен и еукалиптол + еудесмол, како и синтетичкиот органофосфорен малатион со терпени.Оптималната синергетска комбинација на соединенија на малатион + Еудесмол беше тестирана во биоанализа за возрасни инсектициди.Насочете ги големите колонии на инсекти за да потврдите дали овие ефективни комбинации можат да делуваат против голем број индивидуи на релативно големи простори за изложување.Сите овие комбинации покажуваат синергетски ефект против големите роеви инсекти.Слични резултати беа добиени за оптимална синергетска ларвицидна комбинација тестирана против големи популации на ларви Aedes aegypti.Така, може да се каже дека ефективната синергетска ларвицидна и адултицидна комбинација на растителни ЕО соединенија е силен кандидат против постоечките синтетички хемикалии и може дополнително да се користи за контрола на популациите на Aedes aegypti.Исто така, ефективни комбинации на синтетички ларвициди или адултициди со терпени, исто така, може да се користат за да се намалат дозите на тиметфос или малатион што им се даваат на комарците.Овие моќни синергистички комбинации може да обезбедат решенија за идни студии за еволуцијата на отпорноста на лекови кај комарците Aedes.
Јајцата на Aedes aegypti беа собрани од Регионалниот медицински истражувачки центар, Дибругар, Индискиот совет за медицински истражувања и се чуваа под контролирана температура (28 ± 1 °C) и влажност (85 ± 5%) на Катедрата за зоологија, Универзитетот Гаухати под следните состојби: Ариволи беа опишани и сор.По шрафирањето, ларвите биле хранети со храна за ларви (кучешки бисквити во прав и квасец во сооднос 3:1), а возрасните биле хранети со 10% раствор на гликоза.Почнувајќи од третиот ден по појавата, на возрасните женски комарци им беше дозволено да ја цицаат крвта на албино стаорци.Во чаша натопете филтер-хартија во вода и ставете ја во кафезот за поставување јајца.
Избрани растителни примероци имено лисја од еукалиптус (Myrtaceae), свети босилек (Lamiaceae), нане (Lamiaceae), мелалеука (Myrtaceae) и луковици од алиум (Amaryllidaceae).Собрано од Гувахати и идентификувано од Одделот за ботаника, Универзитетот Гаухати.Собраните растителни примероци (500 g) беа подложени на хидродестилација со помош на апарат Clevenger за 6 часа.Извлечениот ЕО беше собран во чисти стаклени вијали и се чуваше на 4°C за понатамошно проучување.
Ларвицидна токсичност беше проучувана со користење на малку модифицирани стандардни процедури на Светската здравствена организација 67 .Користете DMSO како емулгатор.Секоја концентрација на ЕО првично беше тестирана на 100 и 1000 ppm, при што беа изложени 20 ларви во секоја реплика.Врз основа на резултатите, беше применет опсег на концентрации и евидентирана е смртност од 1 час до 6 часа (во интервали од 1 час) и 24 часа, 48 часа и 72 часа по третманот.Сублеталните концентрации (LC50) беа утврдени по 24, 48 и 72 часа од изложувањето.Секоја концентрација беше анализирана во три примероци заедно со една негативна контрола (само вода) и една позитивна контрола (вода третирана со DMSO).Ако се појави пупација и повеќе од 10% од ларвите од контролната група умрат, експериментот се повторува.Ако стапката на смртност во контролната група е помеѓу 5-10%, користете ја формулата за корекција на Абот 68.
Методот опишан од Рамар и сор.69 беше користен за биоанализа за возрасни против Aedes aegypti користејќи ацетон како растворувач.Секој ЕО првично беше тестиран против возрасни комарци Aedes aegypti во концентрации од 100 и 1000 ppm.Нанесете 2 ml од секој подготвен раствор на Whatman број.1 парче филтер-хартија (големина 12 x 15 cm2) и оставете го ацетонот да испари 10 минути.Како контрола се користеше филтер-хартија обработена со само 2 ml ацетон.Откако ќе испари ацетонот, третираната филтер-хартија и контролната филтер-хартија се ставаат во цилиндрична цевка (длабока 10 cm).Десет комарци стари од 3 до 4 дена, кои не се хранат со крв, беа префрлени во три примероци од секоја концентрација.Врз основа на резултатите од прелиминарните тестови, беа тестирани различни концентрации на избрани масла.Смртноста е забележана на 1 час, 2 часа, 3 часа, 4 часа, 5 часа, 6 часа, 24 часа, 48 часа и 72 часа по ослободувањето на комарецот.Пресметајте ги вредностите на LC50 за време на експозиција од 24 часа, 48 часа и 72 часа.Ако стапката на смртност на контролната група надминува 20%, повторете го целиот тест.Исто така, ако стапката на смртност во контролната група е поголема од 5%, прилагодете ги резултатите за третираните примероци користејќи ја формулата на Абот68.
Извршена е гасна хроматографија (Agilent 7890A) и масена спектрометрија (Accu TOF GCv, Jeol) за да се анализираат составните соединенија на избраните есенцијални масла.GC беше опремен со детектор FID и капиларна колона (HP5-MS).Носечкиот гас беше хелиум, брзината на протокот беше 1 ml/min.Програмата GC го поставува Allium sativum на 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M и Ocimum Sainttum на 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280, за нане 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, за еукалиптус 20,60-1M-10-200-3M-30-280, а за црвено За илјада слоеви тие се тие 10: 60-1М-8-220-5М-8-270-3М.
Главните соединенија на секој ЕО беа идентификувани врз основа на процентот на површина пресметан од GC хроматограмот и резултатите од масената спектрометрија (наведени во базата на податоци за стандарди NIST 70).
Двете главни соединенија во секој ЕО беа избрани врз основа на резултатите од GC-MS и купени од Сигма-Олдрич со 98-99% чистота за понатамошни биоанализи.Соединенијата беа тестирани за ларвицидна и адултна ефикасност против Aedes aegypti како што е опишано погоре.Најчесто користените синтетички ларвициди тамефосат (Sigma Aldrich) и лекот за возрасни малатион (Sigma Aldrich) беа анализирани за да се спореди нивната ефикасност со избрани ЕО соединенија, следејќи ја истата постапка.
Бинарни мешавини од одбрани терпенски соединенија и терпенски соединенија плус комерцијални органофосфати (тилефос и малатион) беа подготвени со мешање на дозата LC50 на секое кандидатско соединение во сооднос 1:1.Подготвените комбинации беа тестирани на ларви и возрасни фази на Aedes aegypti како што е опишано погоре.Секоја биоанализа беше изведена во три примероци за секоја комбинација и во три примероци за поединечните соединенија присутни во секоја комбинација.Смртта на целните инсекти е забележана по 24 часа.Пресметајте ја очекуваната стапка на смртност за бинарна смеса користејќи ја следната формула.
каде што Е = очекувана стапка на смртност на комарците Aedes aegypti како одговор на бинарна комбинација, т.е. поврзување (A + B).
Ефектот на секоја бинарна смеса беше означен како синергистички, антагонистички или без ефект врз основа на вредноста χ2 пресметана со методот опишан од Pavla52.Пресметајте ја вредноста χ2 за секоја комбинација користејќи ја следната формула.
Ефектот на комбинацијата беше дефиниран како синергетски кога пресметаната вредност χ2 беше поголема од вредноста на табелата за соодветните степени на слобода (95% интервал на доверба) и ако беше откриено дека набљудуваната смртност ја надминува очекуваната смртност.Слично, ако пресметаната вредност χ2 за која било комбинација ја надминува вредноста на табелата со одредени степени на слобода, но набљудуваната смртност е помала од очекуваната смртност, третманот се смета за антагонистички.И ако во која било комбинација пресметаната вредност на χ2 е помала од вредноста на табелата во соодветните степени на слобода, се смета дека комбинацијата нема ефект.
Три до четири потенцијално синергистички комбинации (100 ларви и 50 ларвицидни и возрасни инсекти активност) беа избрани за тестирање против голем број инсекти.Возрасни) постапете како погоре.Заедно со мешавините, индивидуалните соединенија присутни во избраните мешавини беа исто така тестирани на еднаков број ларви Aedes aegypti и возрасни.Комбинираниот сооднос е еден дел од дозата LC50 од едно кандидатско соединение и дел од дозата LC50 од другото составно соединение.Во биоанализата за активност на возрасни, избраните соединенија беа растворени во растворувачот ацетон и се нанесуваа на филтер-хартија завиткана во цилиндричен пластичен контејнер од 1300 cm3.Ацетонот испаруваше 10 минути и возрасните беа ослободени.Слично на тоа, во ларвицидната биоанализа, дозите на LC50 кандидатските соединенија најпрво беа растворени во еднакви волумени на DMSO, а потоа се мешаа со 1 литар вода складирана во пластични садови од 1300 cc, а ларвите беа ослободени.
Извршена е веројатност за анализа на 71 регистриран податок за смртност со помош на SPSS (верзија 16) и софтвер Minitab за пресметување на вредностите на LC50.
Време на објавување: јули-01-2024 година