Развивањето сигурни и стандардизирани методи за тестирање на осетливоста на ројот комарци на инсектициди е клучно за разбирање на ефикасноста на новите активни состојки или формулации. Методите за тестирање на осетливоста на ројот комарци на контактни инсектициди или производи (како оние што се промовираат во програмите за јавно здравје) се добро воспоставени и стандардизирани. Сепак, методите за тестирање на испарливи или аеросолни инсектициди што се користат во производите за домаќинството е тешко ефикасно да се имплементираат. Врз основа на препораките на Светската здравствена организација за инсектициди за домаќинства, развивме стандардизиран и високопроточен метод за тестирање на аеросолни производи со употреба на комарци во кафези и ефикасен метод за дезинфекција спроведен во тест комора Peet-Grady (тест комора PG). Ја потврдивме ефикасноста на овој нов метод користејќи популации на комарци Aedes и Anopheles отпорни на инсектициди и осетливи. Нова карактеристика на овој метод е вклучувањето на комора насочена кон кафезите за комарци, што овозможува квантитативна проценка на стапките на убивање на комарци во реално време по изложеноста на инсектицид. Дезинфекцијата со стапче ефикасно ги отстранува преостанатите аеросолни масла што содржат пиретроиди од површината на тест комората, со стапки на смртност помали од 2% за осетливи комарци тестирани директно на површината на комората. Не е забележана просторна хетерогеност во стапките на убивање или смртност кај комарците во кафези во PG комората. Нашиот метод со двоен кафез обезбедува осум пати поголем проток од методот со слободен лет, овозможувајќи истовремено тестирање на различни соеви на комарци и ефикасна дискриминација помеѓу осетливи и отпорни популации на комарци тестирани паралелно.
До денес, аеросолните инсектициди првенствено се користат во домовите за лична заштита, со ограничена употреба во програмите за јавно здравје. Сепак, неодамнешните студии покажаа широка употреба на инсектициди во домаќинствата во области каде што се распространети болести што се пренесуваат преку вектори. Без разлика дали мотивацијата е средство за одбивање на комарци или превенција на болести, постои итна потреба од стандардизирани и лесни за употреба методи за скрининг на ендемските популации на комарци за подложност на инсектициди во домаќинствата. Ова е клучно за предвидување на ефикасноста на инсектицидите против локалните вектори и разбирање како употребата на инсектициди во домаќинствата влијае врз еволутивната селекција за отпорност на инсектициди.
Дополнителниот метод 1 дава детални упатства чекор-по-чекор за спроведување на нашата програма за тестирање на аеросолни инсектициди.
Иако упатствата на СЗО препорачуваат употреба на автоматизирани небулизатори, тие не даваат специфични технички спецификации. Употребата на автоматизирани небулизатори е клучна, бидејќи рачната небулизација во комора со пропилен гликол не само што бара многу труд, туку може да предизвика и просторни недоследности и варијации во времетраењето на небулизацијата.
Комората за реакција мора да се стерилизира по секој тест, но методот на внатрешно чистење препорачан во Упатството на СЗО вклучува нанесување вода од црево. Во нашата секојдневна работа, овој метод е најтрудоинтензивниот чекор во работењето со биоаналитичка опрема, па затоа развивме и тестиравме постапка за стерилизација базирана на брис.
Отстранливите делови на вентилаторот се третираат како што е опишано погоре, а лопатките и рамката на вентилаторот се чистат со сунѓер натопен во 5% раствор од Decon 90.
Врз основа на односот помеѓу времетраењето на прскањето и брзината на испорака на производот, нашиот аеросолен диспензер, исто така, покажа добра точност во контролирањето на односот на дозата на аеросолот, барем во тестираниот опсег од 1 до 4 пати. Како што е прикажано на Сл. 3б, оваа карактеристика е особено важна за карактеризирање на односот доза-одговор на новите формулации на аеросол или за одредување на идентификациската доза за откривање на отпорност на инсектициди.
Покажуваме дека нашиот ревидиран протокол за евалуација на аеросолни инсектициди во домаќинствата, со употреба на дезинфекција со брисеви, двојни кафези, далечински контролирани распрскувачи и биометриско снимање од акциони камери, е поефикасна и изводлива алтернатива од сегашнитеСЗОпрепораки. Методот на дезинфекција со брисеви, кој бара само 20 минути, значително заштедува време во споредба со постојниот протокол (кој обично бара еден час по комора за тестирање). Исто така, го намалува времето што операторите го поминуваат носејќи целосна лична заштитна опрема (на пр., респираторни шлемови и антистатичка работна облека). Понатаму, овој метод генерира помалку контаминирана течност и облека за третман отколку целосно чистење на комората за тестирање, со што се минимизира потенцијалот за контаминација на просторијата во која се наоѓа комората за тестирање. Методот на дезинфекција со брисеви е погоден и за дезинфекција на полутрајни простории за тестирање кои бараатминималенпоставување мебел во различни распореди на простории.
Клучно прашање истражено во оваа и други студии е стандардизацијата на дозите на изложеност на инсектициди применети во животната средина низ различни протоколи за тестирање. Како што е прикажано на Слика 2б, и покрај фиксното времетраење на прскањето, волуменот на прскање варираше кај различните типови на аеросолни конзерви, што потенцијално одразува разлики во производствените процеси (на пр., внатрешен притисок, употреба на погонско гориво, структура на млазниците итн.). Понатаму, моменталниот недостаток на комерцијално достапни уреди за далечинско прскање со потребната флексибилност во времетраењето на прскањето ја ограничува нивната употреба при проценка на односот доза-одговор за контрола на комарци. Рачното прскање преку тест отвори или пристапни отвори (доколку се достапни) може да доведе до варијации во дозите на изложеност. Всушност, нашите резултати ја истакнуваат потребата и важноста од намалување на овие извори на варијација. За резистентни популации на Aedes aegypti, забележавме корелација помеѓу дозата на аеросол и конечното одредување на подложноста или отпорноста (Слика 3б). Идеално, дозите на аеросол треба да се стандардизираат во грамови на аеросолизирана супстанција, а не во времетраењето на аеросолизацијата за да се олеснат споредбите помеѓу различните студии.
RCAD нуди алтернативен пристап за идни истражувања што го минимизира влијанието на варијациите во процесот. Иако откривме дека стандардизацијата на аеросолните спрејови не е изводлива, покажавме дека масата на аеросолот што се испорачува преку различни аеросолни конзерви може репродуктивно да се процени со калибрирање на должината на спрејот (слики 2б, 3а). Таквата стандардизација на концентрацијата на аеросол во која било тест комора е клучна за подобрување на репродуктивноста на резултатите.
Врз основа на нашето искуство и искуството на други истражувачки групи, препораките содржани во тековното Упатство во врска со употребата на методи за детекција на аеросоли за тестирање на слободнолетачки комарци претставуваат значајни логистички предизвици за лабораториските и полутеренските студии. На пример, методите за детекција на слободнолетачки комарци имаат многу ниска пропусност (вклучувајќи и трудоинтензивно повторно фаќање на преживеаните слободнолетачки комарци) и страдаат од голем број технички ограничувања, како што се тешкотиите во одредувањето на стапките на убивање во реално време.
Иако нашиот валидиран експеримент со двоен кафез се осврнува на прашањето за ограничувањата на протокот и е изводлив метод за скрининг на подложноста на комарците на аеросолни инсектициди, треба да се напомене дека стапките на смртност кај комарците од Кајманските Острови беа значително пониски во експериментот со кафез отколку во експериментот со слободен лет (Сл. 5в, Табела 1). Оваа разлика може да одразува намалување на дозата на инсектицид во кафезот, бидејќи помалку капки аеросол продираат низ мрежата и влегуваат во кафезот. Идните студии би можеле да користат ткаенини со поголема мрежа и дизајни на кафези со повисоки стапки на проток на воздух од вентилатор (на пр., цилиндрични дизајни) за дополнително потврдување на резултатите добиени со различните експериментални методи.
Време на објавување: 02.02.2026